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　　大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

　　大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa測定試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。往預(yù)先包被大鼠Ⅱ型膠原(COL2)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠Ⅱ型膠原(COL2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計算樣品濃度。

　　大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa測定試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢

　　1、優(yōu)點(diǎn)明顯 眾所周知產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)決定的產(chǎn)品好壞，我司產(chǎn)品具有穩(wěn)定的重復(fù)性，吸附性能好,空白值低，并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測，方法簡單，操作方便，限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

　　2、品質(zhì)保障 產(chǎn)品質(zhì)量，出庫質(zhì)檢把控嚴(yán)格，保障提供給客戶的100%是產(chǎn)品，運(yùn)輸全程跟蹤，公司有任何質(zhì)量問題包退換，誠信經(jīng)營，合作共贏。我們提供實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材一站式供應(yīng)服務(wù)，超低價，高品質(zhì)，進(jìn)口品牌全線代理，優(yōu)勢的渠道，我們只做行貨，不用擔(dān)心質(zhì)量問題。售后技術(shù)支持到底!

　　3、業(yè)定制 應(yīng)市場需求公司特推出業(yè)定制酶聯(lián)免疫分析試劑盒服務(wù)，全程有業(yè)的技術(shù)老師跟蹤并和客戶保持溝通，直到定制成功為止。

　　4、免費(fèi)代測 公司訂購酶聯(lián)免疫分析試劑盒，享全程技術(shù)指導(dǎo)并可免費(fèi)代測，為您分憂。全程有業(yè)技術(shù)老師負(fù)責(zé)代測，收到樣本一般7個工作日出結(jié)果。

　　5、服務(wù)周到 設(shè)立售后服務(wù)中心，24小時及時響應(yīng)，真正做到后顧無憂，不斷完善服務(wù)體系。

　　大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒標(biāo)本要求

　　1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

　　2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

　　3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

　　4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　　5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

　　6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能人上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

　　7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

　　大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒操作流程

　　1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

　　2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

　　3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

　　4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

　　5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350μL)，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

　　6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

　　大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒注意事項(xiàng)

　　1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

　　2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

　　4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　5.底物請避光保存。

　　6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

　　7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

　　8.本試劑不同批號組分不得混用。

　　10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

　　elisa試劑盒 我司由具有行業(yè)背景和豐富市場經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成，于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)�；�生產(chǎn)各個階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司