技術文獻
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%) 天津本生
產品名稱胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)
REF:CC032
儲運條件
-20℃保存。
產品組成
組分規(guī)格 CC032-100ml CC032-500ml
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%) 100ml 500ml
主要成分:主要由 0.25%胰酶、0.02%EDTA 等組成,不含酚紅,過濾除菌。
自備材料:
1. 微量移液器
2.PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液
3. 顯微鏡
4. 離心機
產品簡介
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。膚
蛋自酶的特點還在于已經活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將
蛋自質水解為肽,進而分解為氨基酸,其適溫度約為37℃。
Regal的Trypsin-EDTA solution:含0.25%胰班、0.02%EDTA。該落液經過過混除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一
些組織的消化。該產品通常室溫消化 Imin 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。
使用方法(僅供參考)
1.貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
2加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min,不同的細胞消化時間有所不同。
、埏@微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液,加入含血清的細腳培手清,吹打下細胸,即可直接用干后續(xù)空驗。
、苋绻l(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
5如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心lmin,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2.組織的消化
不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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