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　　本生詳述：酵母選擇營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基

　　一、選擇性營養(yǎng)缺陷型酵母培養(yǎng)基SD培養(yǎng)基(Synthetic Dropout Media)SC-Droupout

　　酵母缺陷培養(yǎng)基種類：一缺培養(yǎng)基單缺培養(yǎng)基/二缺培養(yǎng)基雙缺培養(yǎng)基/三缺培養(yǎng)基/四缺培養(yǎng)基/五缺培養(yǎng)基

　　(1) 一缺培養(yǎng)基：以SD-Ura(Sc-Ura培養(yǎng)基)為代表的此類酵母SC選擇培養(yǎng)基或SD缺陷培養(yǎng)基主要用于單質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選

　　用途：外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化

　　SD/-Trp， SD/-Leu， SD/-His， SD/-Ura， SD/-Met， SD/-Ade

　　SC-Trp，SC-Leu， SC-His， SC-Ura， SC-Met， SC-Ade

　　(2) 二缺培養(yǎng)基：此類酵母SC選擇培養(yǎng)基-SD培養(yǎng)基用于雙質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選

　　用途：外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化

　　免疫共沉淀(Coimmunoprecipitation)、Y187和AH109 酵母交配實驗、接合型二倍體篩選

　　SD/-Trp-Leu，SD/-Trp-His，SD/-Trp-Ade，SD/-Leu-Ade，SD/-His-Ade， SD/-Leu-His， SD/-Ura-Trp， SD/-Ura-Leu，SD/-Ura -His

　　SC-Trp-Leu， SC-Trp-His， SC-Trp-Ade， SC-Leu-Ade， SC-His-Ade， SC-Leu-His， SC-Ura-Trp， SC-Ura-Leu，SC -Ura-His

　　(3) 三缺培養(yǎng)基：此類酵母SC選擇培養(yǎng)基-SD培養(yǎng)基用于雙質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選和報告基因檢測

　　用途：外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)報告基因檢測

　　Y187和AH109 酵母交配實驗后報告基因分析(His3，Ade2)

　　SD/-Trp-Leu-His ，SD/-Trp-Leu-Ade， SD/-Ura-Trp-His， SD/-Ura-Leu-His，SD/-Trp-His-Ade， SD/-Ura-Trp-Leu

　　SC-Trp-Leu-His ，SC-Trp-Leu-Ade， SC-Ura-Trp-His， SC-Ura-Leu-His，SC-Trp-His-Ade， SC-Ura-Trp-Leu

　　(4) 四缺培養(yǎng)基：此類酵母SC選擇培養(yǎng)基-SD培養(yǎng)基主要用于報告基因分析

　　用途：酵母雙雜交系統(tǒng)和酵母三雜交系統(tǒng)報告基因檢測 、Y187和AH109 酵母交配實驗后報告基因分析(His3，Ade2)

　　SD/-Trp-Leu-His-Ade， SD/-Ura-Trp-Leu-His， SD/-Ura-Trp-Leu-Met

　　SC-Trp-Leu-His-Ade， SC-Ura-Trp-Leu-His， SC-Ura-Trp-Leu-Met

　　(5) 五缺培養(yǎng)基：此類酵母SC選擇培養(yǎng)基-SD培養(yǎng)基主要用于報告基因分析和表型分析

　　用途：酵母三雜交系統(tǒng)報告基因檢測(His3，Ade2)、酵母營養(yǎng)缺陷型分離鑒定和表型分析

　　SD/-Trp-Leu-His-Ade-Met， SD/-Ura-Trp-Leu-His-Ade，SD/-Ura-Trp-Leu-His-Met，SD/-Ura-Trp-Leu-Ade-Met

　　SD/-Ura-Leu-His-Ade-Met

　　SC-Trp-Leu-His-Ade-Met， SC-Ura-Trp-Leu-His-Ade，SC-Ura-Trp-Leu-His-Met，SC-Ura-Trp-Leu-Ade-Met

　　SC-Ura-Leu-His-Ade-Met

　　(6) 六缺培養(yǎng)基：此類酵母SC選擇培養(yǎng)基-SD培養(yǎng)基主要用于報告基因分析、表型分析和藥物毒理分析

　　用途：酵母三雜交系統(tǒng)報告基因檢測、酵母營養(yǎng)缺陷型分離鑒定和表型分析、藥物毒理分析

　　SD/-Ura-Trp-Leu-His-Ade-Met， SC-Ura-Trp-Leu-His-Ade-Met

　　上述培養(yǎng)基稱為選擇性營養(yǎng)缺陷型酵母培養(yǎng)基，主要用于酵母質(zhì)粒轉(zhuǎn)化篩選，故又稱為酵母選擇培養(yǎng)基。

　　培養(yǎng)基配制方法注意事項：

　　1: 上述培養(yǎng)基含有各種所需成分(葡萄糖除外，因為有些研究者需要用其他糖類如用半乳糖誘導(dǎo)GAL1啟動子表達(dá))，為各種氨基酸和酵母含氮堿/酵母氮源的精細(xì)混合物干粉，按照8g/L稱取，加水后即可配制成相應(yīng)的培養(yǎng)液， 無需再購置添加Minimal SD Base或其他酵母氮源成分。高壓滅菌后加無菌葡萄糖至終濃度為2%(或棉子糖)或?qū)嶒炈�需的特定誘導(dǎo)物(如半乳糖用于GAL1啟動子誘導(dǎo)表達(dá)的劑量或濃度為2%)即可，適用于外源基因在酵母中的表達(dá)，酵母單雜交(yeast one-Hybrid)和酵母雙雜交(yeast two-Hybrid)系統(tǒng)等的選擇缺陷型培養(yǎng)，篩選含特定標(biāo)志基因的酵母表型。

　　2: 在配制酵母缺陷培養(yǎng)基時，可以先加入葡萄糖后再高壓，對酵母的生長不會產(chǎn)生嚴(yán)重影響。但如加入葡萄糖后再高壓消毒則培養(yǎng)基會變色，由淺黃到深褐色不等，對細(xì)胞的生長還是有一定影響的(但在一般情況下不會影響實驗)。FunGenome suggestion: 由于氨基酸和葡萄糖在高溫高壓下可起化學(xué)反應(yīng)，因此技術(shù)部不建議將葡萄糖加入后高壓，而建議用上述提示1的方法配制。

　　3: FunGenome suggestion : 棉子糖和半乳糖原則上是不能高溫高壓的，因為在高溫高壓下其化學(xué)結(jié)構(gòu)會發(fā)生變化從而對誘導(dǎo)效果產(chǎn)生抑止，這一點特別提醒研究者務(wù)必注意，尤其是在做表達(dá)調(diào)節(jié)介導(dǎo)的功能互補實驗時至關(guān)重要!

　　4：制備平皿即軟瓊脂半固體培養(yǎng)基(瓊脂粉按2%即每100ml加2克瓊脂粉)用于轉(zhuǎn)化篩選時，高壓需要將pH調(diào)至6.0左右(為方便起見，pH范圍可在5.6-6.5之間變化)，而液體培養(yǎng)基則不需要調(diào)pH。

　　酵母選擇營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基 本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司