技術(shù)文獻(xiàn)
三組織切片染色操作步驟
1、工作液的配制: 按試劑(A): 試劑(B) =1:9配制Giemsa stain工作液,即取1份的Giemsa stain儲(chǔ)存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中,充分混勻,即為Giemsa stain工作液。配制后的Giemsa stain工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。
2、新鮮組織立即置于Regaud固定液固定2天,期間應(yīng)更換1次固定液。
3、3%的重鉻s鉀固定1天。
4、流水沖洗16個(gè)小時(shí)或過(guò)夜。
5、按照常規(guī)脫水、包埋。
6、切片,厚度約為5μm。
7、常規(guī)脫蠟至水。
8、蒸餾水清洗2次,每次約1min。
9、置于含有Giemsa stain工作液的染缸內(nèi),浸染18~24h。
10、蒸餾水稍微清洗。
11、0.1~0.5%的乙酸洗1~2min。
12、自來(lái)水稍微沖洗。
13、用無(wú)水乙醇迅速脫水3次,每次5~10s。
14、二j苯透明。
15、中性樹(shù)脂封固。
三組織切片染色 染色結(jié)果:
細(xì)胞核藍(lán)色至紫色
細(xì)胞質(zhì)淡藍(lán)色
嗜鉻細(xì)胞胞質(zhì)黃綠色
結(jié)締組織淡紅色
注意事項(xiàng):
1、 血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻,以免影響染色結(jié)果。
2、 涂片染色中Giemsa染色后,請(qǐng)勿先去除染液或直接對(duì)涂片用力沖洗。
3、 如果染色過(guò)深或過(guò)淺,應(yīng)調(diào)整染色時(shí)間或工作液的濃度。
4、 Giemsa涂片染色和組織切片染色中,pH值對(duì)染色有一定影響,載玻片應(yīng)清潔無(wú)酸 堿污染以免影響染色結(jié)果。
5、染色液在稀釋后液面應(yīng)有金屬光澤,表示染液有染色作用,否則染色液可能失效。 6、 Giemsa組織切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%的乙酸急速?zèng)_洗,避免浮面 沉淀 物污染切片后難以洗脫。
7、0.1~0.5%的冰乙酸分化,常用于Giemsa組織切片染色,如有必要亦可用于細(xì)胞涂片,但其濃度應(yīng)適量下調(diào)。0.5%的冰乙酸分化切片時(shí),切片呈粉紅色即可終止。
8、Giemsa組織切片染色中,無(wú)水乙醇脫水要迅速,否則切片易褪色。
9、Giemsa涂片染色和組織切片染色中,如需急速獲得結(jié)果,可以按Giemsa stain儲(chǔ)存液:磷酸鹽緩沖液(1×) =1:1配制,即取吉姆薩儲(chǔ)存液(10×)1份、磷酸鹽緩沖液(1×)1份,充分混勻,即為快速吉姆薩染色工作液,將染色液滴加于細(xì)胞涂片或組織切片上,加熱染色,20~30s后重新加染色液,反復(fù)5~10次,其余步驟同上。
10、染色液可重復(fù)使用,但不能多次重復(fù),若有沉淀物應(yīng)過(guò)濾后使用。
11、Regaud固定液:按3%重鉻s鉀水溶液:甲醛=4:1配制,臨用混勻,1~2天后失效。
12、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 13、使用場(chǎng)所應(yīng)通風(fēng),并遠(yuǎn)離火源。
有效期: 24個(gè)月有效甲基綠。
三組織切片染色 天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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