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抗酸染色液染色原理及作用2023資料已更新
閱讀次數(shù):15395 發(fā)布時(shí)間:2023/3/9 9:56:56
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  抗酸染色液染色原理及作用

  抗酸染色法acid-fast staining method 1882年由埃利希(F.Ehrlich)創(chuàng)并經(jīng)F.Ehrlich)齊爾(Ziehl)改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法。其中代表性的為對(duì)結(jié)核菌的齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法和齊爾-加貝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸乙醇分色,再用美藍(lán)進(jìn)行對(duì)比染色,即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。

  抗酸染色的原理:

  分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經(jīng)過加熱和延長(zhǎng)染色時(shí)間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗酸染色。

  齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍然為紅色,而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。

  抗酸染色的染液配制:

  1、石炭酸復(fù)紅

  堿性復(fù)紅酒精飽和溶液 10mL

  5%石炭酸 90mL

  2、3%鹽酸酒精

  濃鹽酸 3mL

  95%酒精 97mL

  3、呂氏美蘭液

  美蘭酒精飽和液 30mL

  氫氧化鉀(1:10000) 100mL

  抗酸染色液 染色結(jié)果:

  抗酸菌被染成紅色,為抗酸陽性;其它細(xì)菌染成藍(lán)色,為抗酸陰性。背景細(xì)胞及雜質(zhì)也被染成藍(lán)色。

  注意事項(xiàng):

  1.染色程度可通過改變?nèi)旧珪r(shí)間或染色溫度做適當(dāng)調(diào)整。

  2.每次試劑用完后,請(qǐng)迅速蓋好,以免揮發(fā)。

  3.石炭酸對(duì)皮膚、粘膜有強(qiáng)列刺激性和腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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