技術(shù)文獻(xiàn)
Masson 三色染色試劑盒染色原理方法
結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維、而膠原纖維(collagen fiber)是分布廣、含量多的一種纖維。
Masson三色染色是結(jié)締組織染色中經(jīng)典的一種方法,是顯示組織中纖維的主要方法,是膠原纖維染色權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān),分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍(lán)色,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson 三色染色試劑盒主要成份:
1.weigert鐵蘇木素A液
2.weigert鐵蘇木素B液
3.麗春紅酸性品紅染液
4.磷鉬酸溶液
5.苯胺藍(lán)溶液
樣本要求: 組織片充分固定和脫蠟。
Masson 三色染色試劑盒染色方法:
1.組織固定于bouin氏液或zenker氏液,流水沖洗過夜,常規(guī)脫水包埋
2.切片脫蠟至水
3.weigert鐵蘇木素(weigert鐵蘇木素A、B液等比例混和)染5-10分,流水稍洗
4. 1%鹽酸酒精分化,流水沖洗數(shù)分
5. 麗春紅酸性品紅染液染5-10分,流水稍沖洗。
6.磷鉬酸溶液處理約5分鐘,不用水洗,直接用苯胺藍(lán)人染液復(fù)染5分鐘
7. 1%冰醋酸處理1分鐘,95%酒精脫水多次。.無水酒精脫水、二甲苯透明,中性樹膠封固。
Masson 三色染色檢驗(yàn)結(jié)果:
膠原纖維、粘液、軟骨呈藍(lán)色,肌纖維、纖維素和紅細(xì)胞染紅色、胞核染藍(lán)黑色。、
注意事項(xiàng):
1.weigert鐵蘇木素分A、B兩液,應(yīng)與臨用將兩液等分混合,而不宜預(yù)先混合,否則容易氧化沉淀而逐漸失去染色能力。
2.組織用bouin氏液或zenker氏液固定為佳,如已用10%甲醛液固定,切片可在脫蠟至水后,再放入bouin氏液作用一晚或置37℃溫箱內(nèi)1-2小時(shí),然后流水沖洗切片至黃色消失再進(jìn)行染色。
3.磷鉬酸處理時(shí),要鏡下控制,見肌纖維呈紅色,膠原纖維呈淡紅色即可。
Masson 三色染色試劑盒,常賣規(guī)格為7*50ml和7*100ml兩種。主要用于膠原纖維和肌纖維的鑒別染色。 由mallory三色染色改造,利用兩種或三種陰離子染料混合一起或先后作用完成染色,與陰離子染料分子大小和組織的滲透性有關(guān)。根據(jù)組織不同的滲透性能,選擇分子大小不同的陰離子的染料進(jìn)行染色,便可把不同組織成份顯示出來。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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