技術(shù)文獻(xiàn)
本生解析:elisa試劑盒及方法原理
本生公司技術(shù)員為elisa試劑盒新手入門的使用技術(shù)報告做出一番整理,在這里分享給您,供參考。
ELISA方法原理
1. 雙抗體(原)夾心法:檢測抗原(體)的常見方法,應(yīng)用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原(適用于二價以上抗原,不能測 小分子半抗原)。
2. 間接法:檢測抗體的方法,利用酶標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。
3. 競爭法:檢測抗原或小分子半抗原、抗體,以測抗原為例,使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,結(jié)果如待測抗原含量越多,與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少,顯色越淺,二者呈負(fù)相關(guān)。
◎ elisa試劑盒操作注意
、 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
、 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
③ 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
elisa試劑盒分析
1. 人員培訓(xùn)內(nèi)容包括:
①檢驗項目的基本原理(ELISA試劑盒原理);
、谑煜z測技巧,了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點;熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);③熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識;
、苣承┨厥忭椖康臋z測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。
2. 基本了解
① 1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗發(fā)展為ELISA試劑盒技術(shù)。
② 特點:ELISA試劑盒在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"。
、 酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號放大;
、 有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程;
、 靈敏度特異性相對較高。
、 局限性:只能檢測到ng水平
、 精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
、 ELISA檢測試劑盒線性范圍窄(一個數(shù)量);
、 存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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