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　　本生帶您了解、胞凍存的正確方法
 

　　我們在做細(xì)胞實驗的時候經(jīng)常會有凍存的的情況，但細(xì)胞凍存的正確方法你用對了嗎?

　　先冷凍保存方法:

　　1、傳統(tǒng)方法：冷存管置于4C10分鐘－－>-20C30分鐘－－>-80C 16~ 18小時(或隔夜)－－>液氮槽vaporphase儲存。

　　-20C不可超過1小時，以防止胞內(nèi)冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

　　2、程序降溫：利用已設(shè)定程序的等速降溫機以-1~-3C/分鐘之速度由室溫降至(-80C以下) -120C，再放在液氮槽vaporphase儲存。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。

　　3、HAKATA無血清細(xì)胞凍存： 加入HAKATA無血清細(xì)胞凍存液制成懸液，直接凍于-80°C，可保存≥5年。

　　凍存管操作步驟:

　　1、冷凍24-48小時更換半里或全里培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生。

　　2、配制冷凍保存溶液(使用配制):另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞礬(DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

　　3、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少里細(xì)胞懸浮液(約0.1m1)計數(shù)細(xì)胞濃度及凍存活率。

　　4、取與細(xì)胞懸液等里的凍存液，緩慢逐商加入細(xì)胞懸液，并晃動試管，制成細(xì)胞凍存懸液( DMSO醉后濃度為5~ 10%)，使細(xì)胞濃度為1~5x 10*cells/ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中，1~ 2nl/mal,并取.少里細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。

　　凍存管本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司