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移液器問題大全:移液器的選擇及注意事項
移液器的選擇與很多因素有關(guān),大概可以分類如下:一,移液器的因素,如精度、量程、材質(zhì)、設(shè)計和價格等,zui近幾年人體工程學的概念也進入了人們的視線;二,供應商的因素,如合作關(guān)系和服務等;三,使用者的因素,如使用習慣和應用域等。
精度
鄙人所說的移液器的精度,是指準確性和重復性。對此,各品牌的表述并不一致,有的說是準確度和度,有的說是系統(tǒng)誤差和偶然誤差。但既然是我自己寫的東東,就不管別人是怎么說的,總是以自己的為準。
所謂準確性,是指測定值與真實值(設(shè)定值)符合的程度,也就是測量值與真實值的差距大小,而在實際計算時,我們往往把設(shè)定值作為真實值(對于絕大多數(shù)移液器,其zui大的量程的準確性一般在±1%左右);所謂重復性,是指單次測定值與平均值符合的程度。至于具體的計算方法,對于使用者而言用處不大,我也將在以后討論“移液器的校準”時進一步展開。
一般說來,以下兩點對我們認清宣傳手冊上的精度數(shù)據(jù)有所幫助:其一,制造商的中文版手冊上的精度數(shù)據(jù)應該與其英文版*一致,如不一致,就有“作bi”的嫌疑;其二,在移液器市場上影響較大的品牌,其提供的技術(shù)數(shù)據(jù)可信度更高。
還有一點不得不提,國內(nèi)有相關(guān)的計量檢定標準(中華人民共和國國家計量檢定規(guī)程JJG 646-2006 :移液器),該文件對國家的精度標準作了詳細的闡述。對于該文件,我想說明其兩點不足之處:一,其小量程移液器的精度要求過低,目市場上的各品牌的出廠標準均遠高于該國家標準;二,其大量程移液器(1000ul及以上)的10%量程點的精度要求過高,目沒有一個品牌的出廠數(shù)據(jù)能達到其標準。
量程
對于可調(diào)量程單道移液器,目常見的量程范圍有0.1-2ul、1-10ul、2-20ul、5-50ul、10-100ul、20-200ul、30-300ul、100-1000ul、500-5000ul、1-10ml和2-20ml;對于可調(diào)量程多道移液器,目常見的量程范圍有1-10ul、2-20ul、5-50ul、10-100ul、20-200ul、30-300ul和100-1200ul?梢哉f,沒有一個品牌的產(chǎn)品可以*涵蓋以上量程。
對于量程,我想可以從以下幾個方面來理解:
一,移液器的量程范圍一般是其zui大量程到其zui大量程的10%。如果您需要某一個量程范圍的移液器,您只要說出其zui大量程即可,一般情況下供應商都能明白您的意思。舉例而言,如果您說到200ul的移液器,一般意味著這支移液器的量程范圍是20-200ul。當然,少數(shù)移液器標稱的zui小量程是其zui大量程的5%甚至更小,這多數(shù)是個“噱頭”,實際用處一般不大。
第二,對于同一支移液器,一般隨著其移液量的變小,其精度也越來越小。一般說來,當移液量為zui大量程的50%時,其精度比zui大量程時略小,但變化不大;當移液量為zui大量程的10%時,其精度與zui大量程時相比會差很多。不妨舉個例子,對于zui大量程為20ul、200ul和1000ul的移液器,當在zui大量程點使用時,準確性(±%)一般都在1左右,重復性(≤%)一般是0.1-0.3;而當在10%量程點使用時,準確性(±%)一般是3-8,重復性(≤%)一般是0.5-2。
第三,一支移液器的zuijia使用量程范圍是其zui大量程到其zui大量程的1/3左右。如果您對精度有一定的要求,一般不建議在zui大量程的1/3到zui小量程范圍內(nèi)使用移液器。再舉個例子。如果您有兩支移液器,量程范圍分別是1-10ul和10-100ul,這并不意味著您可以用這兩支移液器實現(xiàn)在1-100ul范圍內(nèi)的準確移液器,您可以準確移液的范圍只有3-10ul和33-100ul;如果您想實現(xiàn)在1-100ul范圍內(nèi)的準確移液,在的情況下恐怕您需要6支移液器,其量程范圍分別是0.1-2ul、0.5-5ul、1-10ul、2-20ul、5-50ul和10-100ul(當然,目還沒有什么品牌可以完整的提供這個組合,只能是盡量做到合理搭配)。
材質(zhì)
移液器的精度和壽命如何,與移液器的材質(zhì)緊密相關(guān)。
移液器一般由數(shù)十個部件組成,而這些部件的功能不同,對材質(zhì)特點的要求也不同,材質(zhì)也就不可能*相同了。但總體上,還是有些許規(guī)律的:其一,多數(shù)是塑料部件。畢竟塑料容易加工、重量輕,成本也相對低廉;其二,所有部件都需要有一定的熱穩(wěn)定性。
對于制造商而言,移液器各部件的材質(zhì)基本不會對外公開的,本人手頭的資料也是少的可憐;對于使用者而言,也只能關(guān)注幾個容易了解且比較重要的部件:
一.槍體(手握持的部分)。比較容易理解的是這一部分需要耐腐蝕、耐磨損,而容易被忽視的是這一部分需要很低的熱傳導性:如果手握持移液器的時間較長,有可能通過槍體把手溫傳導到內(nèi)部的部件上,造成這些部件的變形,從而影響移液器的精度。這個部件目基本上都是用塑料,其中比較好的是PVDF(聚偏氟乙烯);
二.套柄(或稱套筒,指移液器的下半部分,一般為白色塑料)。除了耐腐蝕外,還需要:其一,耐磨損。套柄的下端需要不斷與吸頭發(fā)生摩擦;其二,耐沖擊。在國內(nèi),由于大多數(shù)情況下用質(zhì)量較差的吸頭,在裝吸頭時需要用較大的力。為了解決這兩個問題,有的品牌在其套柄的下端甚至整個套柄使用了金屬材質(zhì);有的品牌則在設(shè)計上下功夫,減少套柄與吸頭的摩擦并減少裝吸頭的用力,這樣對套柄材質(zhì)的要求就降低了;
三.活塞(位于移液器下半部分的套柄內(nèi))。目zui常用的材質(zhì)有兩種:一是不銹鋼。不銹鋼的機械加工性能較好,容易實現(xiàn)密封,并且強度高,不易變形,能非常高的精度,是移液器的普遍選擇。但不銹鋼也有缺點,那就是耐腐蝕性較差。因此,不銹鋼活塞對日常的使用和保養(yǎng)要求較高;二是塑料。塑料容易成型且成本低廉,低端移液器上使用比較普遍。同時,塑料也有很大的缺點,就是容易變形,很難保持較高的密封性,從而降低了移液器的精度。除了以上兩種,市場上還有一些特殊的材質(zhì):一是陶瓷(代表品牌是EPPENDORF,其中間量程移液器的活塞為陶瓷材質(zhì))。
四.密封圈(安裝于活塞上)。因為密封圈可能會受到各種化學介質(zhì)的“攻擊”,且對密封性的影響很大,需要保持較長的青春,所以是用PTFE(聚四氟乙烯)等耐腐蝕、不易變形的材質(zhì)。
量程鎖定。目市場上大部分移液器的吸/排液按鈕同時兼任調(diào)節(jié)量程的任務。當人們在進行移液操作時,拇指不可能*向下用力,總有少部分力用到了旋轉(zhuǎn)按鈕的方向。因此,多次移液操作后,原來設(shè)定好的量程就可能被悄悄的“篡改”了!為了解決這個問題,不同的品牌各顯其能:有的品牌(如RAININ)在按鈕下方裝一個旋鈕,在調(diào)節(jié)量程旋開而在操作旋緊;有的品牌(如BIOHIT)在數(shù)字顯示窗口邊加一個小按鈕,只有按下這個按鈕,才可以調(diào)節(jié)量程。當然,有的品牌改的更*,如EPPENDORF和Hamilton的產(chǎn)品讓量程調(diào)節(jié)旋鈕與吸/排液按鈕分開,各司其職。
指鉤。所謂指鉤,顧名思義就是在移液器上部一個可以讓移液器掛在手指上的一個“小鉤子”。指鉤的作用有三:其一,將移液器的重量均勻的分布在食指指根上,讓手“感覺”移液器輕一點;其二,在移液過程中固定移液器,讓移液器不會隨拇指的下壓而向下移動,部分也減少了手的負擔;其三,在移液及移液間隙,讓手不需要時刻緊握移液器,從而讓手得到適當?shù)姆潘伞,F(xiàn)在,各品牌的產(chǎn)品均有指鉤的設(shè)計,大多數(shù)也能實現(xiàn)指鉤的作用。然而,突出的反面教材是GILSON,其指鉤徒有其表而幾乎沒有任何實際作用。
退吸頭裝置。退吸頭裝置有兩部分組成:上半部分指退吸頭按鈕和“隱藏”在槍體內(nèi)的傳動裝置,這半部分不是討論的重點;下半部分是退吸頭臂,其主要設(shè)計要求是方便拆裝而不會自行松動甚至脫落。方便拆裝的目的是便于槍體下半部分的維護保養(yǎng)(國內(nèi)的移液操作多不規(guī)范,維護保養(yǎng)*);如果會自行脫落則會影響移液操作。對此,EPPENDORF和GILSON的設(shè)計都過于老化,難以同時達到要求。做得比較好的是SOCOREX,其類似于旋鈕的設(shè)計比較的同時實現(xiàn)了上面兩項要求;另外,還有RAININ,其狀如蝴蝶扣的設(shè)計也能令人滿意。補充一句,SOCOREX的退吸頭臂的下端與吸頭上沿的距離可以調(diào)節(jié),方便的適應了不同品牌的吸頭,這一設(shè)計也頗有見地。
人體工程學
所謂人體工程學,通俗的解釋就是:*,讓人使用工具的時候感覺爽;第二,長時間使用后,人仍然能感覺比較爽;第三,頻繁的使用,不會傷害到人的健康。在上世紀九十年代初,RAININ先把人體工程學的概念引入移液器的設(shè)計;到現(xiàn)在,幾乎已經(jīng)沒有一個品牌不考慮人體工程學的因素了。
具體到移液器,人體工程學的要求基本是手感好、使用方便和省力。其實,面我們在討論移液器的設(shè)計時,已經(jīng)觸及了很多人體工程學的因素。下面只是一個簡單的補充。
所謂使用方便,主要是:其一,可以比較方便的進行單手操作;其二,無論是左手還是右手,都可以輕松的使用這支移液器,從而讓使用者需要在長時間連續(xù)使用移液器的情況下可以左右手交換使用;其三,可以輕松的進行量程設(shè)定;其四,可以做到量程鎖定,不需要在操作過程中頻繁的檢查量程是否有變化。
總之,健康是*位的,在使用移液器的時候不能忽視了對手和腕,特別是拇指的保護。特別是身強體壯的朋友,千萬不要因為自己力氣大而放松警惕。
消毒與滅菌
在移液器這個行業(yè)里,消毒與滅菌的概念常常是被混用的。而事實上,兩者有一定的區(qū)別:消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范圍內(nèi),達到無害化水平,而滅菌則要求消滅所有活菌。因此,滅菌的處理要求高于消毒。
1.化學消毒。簡單說來,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。這對于所有移液器品牌而言都應該是可以做到的,否則其外殼的材質(zhì)也太差了!
2.紫外線消毒。用紫外線照射移液器的表面,通過破壞細胞的DNA結(jié)構(gòu)來達到消毒的目的。紫外線消毒的時間取決于輻射強度和細菌對紫外線的抵抗力的強弱。多數(shù)品牌的移液器是可以用紫外線消毒的,但需要事先與供應商進行確認。
3.高溫高壓滅菌。通常來說,移液器高溫高壓滅菌的工作條件是:102.9kPa(1.05kg/cm2),121℃,20分鐘。移液器的高溫高壓滅菌分為整支滅菌和半支滅菌,絕可以大多數(shù)品牌的移液器都可以半支滅菌,但是否能整支滅菌,使用者一定要與供應商確認。市場上,GILSON和RAININ等品牌沒有整支滅菌的產(chǎn)品,EPPENDORF的Reference和Research plus、BIOHIT的m-Line、BRAND的Trasferpette S和Hamilton手動移液器等產(chǎn)品可以整支滅菌。不過這里需要提醒幾點:*,除了個別應用,如傳染性病毒研究,多數(shù)客戶并不需要整支滅菌;第二,對于同品牌的產(chǎn)品,往往整支滅菌的貴于半支滅菌的,客戶需根據(jù)自己的需要作出決定。
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