技術(shù)文獻(xiàn)分享-ELISA試劑盒對(duì)組織切片如何處理_技術(shù)文章

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技術(shù)文獻(xiàn)分享-ELISA試劑盒對(duì)組織切片如何處理
閱讀次數(shù)：15654 發(fā)布時(shí)間：2020/12/25 14:12:33

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　　技術(shù)文獻(xiàn)分享-elisa試劑盒對(duì)組織切片如何處理

　　ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)不建議固定組織24小時(shí)以上，因?yàn)楣潭ㄟ^度可能導(dǎo)致抗原的遮蔽。組織在固定后可轉(zhuǎn)移至酒精中，直至包埋過程。因?yàn)槭炁c水是不混溶的，ELISA試劑盒所以組織在加入熔化的固體石蠟必須脫水。脫水是通過浸潤在濃度遞增的酒精中而實(shí)現(xiàn)的。這種方法逐步改變疏水性，讓細(xì)胞傷害小化。脫水之后，組織與二甲苯共同孵育，以去除任何殘留的酒精。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　　>固定可通過灌注或解剖后立即浸潤來實(shí)現(xiàn)，般需要4-24小時(shí)。石蠟般加熱到60?C進(jìn)行包埋，隨后經(jīng)過夜硬化。血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。

　　>仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。

　　>ELISA試劑盒利用切片機(jī)用鋒利的刀片將組織切成超薄的切片。切片在顯微鏡載玻片上干燥，并長時(shí)間室溫儲(chǔ)存。組織切片在開始IHC/ICC步驟之必須再水化。

　　>研究人員發(fā)現(xiàn)，當(dāng)實(shí)驗(yàn)鼠的食物中含有較多糖分時(shí)，由此產(chǎn)生的葡萄糖會(huì)妨礙這種細(xì)胞的功能，使其分泌下丘腦泌素的量減少，從而讓實(shí)驗(yàn)鼠易困。如果食物中含有較多的蛋白質(zhì)，ELISA試劑盒由此產(chǎn)生的則能起到相反的效果，有助實(shí)驗(yàn)鼠保持清醒。仔細(xì)收集上清。分裝后份待檢測(cè)，其余冷凍備用。組織在用石蠟包埋之必須固定。細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。石蠟包埋為長期保存組織樣本提供了合適選擇。血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　　>ELISA試劑盒石蠟是組織包埋的便宜也是常用的物質(zhì)。

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原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司