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　　技術(shù)文獻(xiàn)分享-獲取ELISA穩(wěn)定結(jié)果步驟

　　1、選擇同批次的試劑

　　雖然，每個廠家都會對不同批次的試劑盒進(jìn)行質(zhì)量控制檢測，但嚴(yán)格得說，每個批次的產(chǎn)品間，都或多或少還是會有可接受范圍的差異，有些是10%、有些是15%。所以如果在進(jìn)行大批量或長時間樣品的篩檢的時候，能夠預(yù)先把樣本包含重復(fù)實驗數(shù)量和質(zhì)控樣品數(shù)量都先估算清楚，購買同個批次的試劑盒會減少不同批次造成的數(shù)據(jù)漂移。

　　2、預(yù)包被試劑盒

　　依照ELISA操作步驟來手工操作包被，雖然并不是特別困難的實驗，缺點是受單次手工包被能夠運行板數(shù)的限制，并且不同次包被出來的板難免會有差異。因此，使用廠家機械化大量預(yù)包被好的試劑盒，能夠減少手工包被的誤差，使孔間跟板間的誤差減到小。

　　3、精簡工作流程

　　雖然，使用預(yù)包被ELISA操作步驟會比自行包被省時省力，但仍需要17個步驟才能獲得后的數(shù)據(jù)，而且這17個步驟中，每步都有可能引入誤差。

　　所以，精簡操作步驟，就能夠進(jìn)步減少誤差。

　　4、正確的處理樣品跟對照品

　　許多細(xì)胞因子表達(dá)量低，很容易在樣品運送過程中或是保存不當(dāng)?shù)那闆r下降解，導(dǎo)致無法檢測到。因此，適當(dāng)?shù)谋４姝h(huán)境、避免超過次以上的凍解，都是必須要考量的樣品處理步驟。

　　另外，除了空白和/或陰性對照之外，相同的陽性對照放在不同板上同時檢測也是非常重要的對照品。

　　5、可靠設(shè)備提高數(shù)據(jù)致性清洗是否完全，也會造成ELISA的結(jié)果變異。

　　如果需要清洗多個ELISA板，自動化洗板機除了減少人力、還能夠減少誤差。

　　6、就是讀取數(shù)據(jù)的酶標(biāo)儀了，個佳條件的讀板儀必備條件包括：

　　1、集成的孵育箱和振蕩器，可消除使用孵育 ELISA 其他儀器的需求

　　2、參考校準(zhǔn)系統(tǒng)，可跟蹤和檢測器的自然變化

　　3、良好的板/孔定位準(zhǔn)確度和精度以及驗證板運動的方法

　　4、 選擇在板移動和讀取吸光度之間使用液體沉降延遲

　　5、 可以對來自不同制造商的板使用單獨的板尺寸圖

　　6、 全自動且連續(xù)的診斷，并報告讀板器狀態(tài)和性能信息

　　7、 特殊功能確保數(shù)據(jù)質(zhì)量和數(shù)據(jù)安全

　　8、 驗證每個運動組件的移動(例如板載、光學(xué)頭、濾光片輪)

　　9、 執(zhí)行外部驗證的選項

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