技術(shù)文獻(xiàn)
本生闡述:小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的小鼠γ 干擾素(IFN-γ)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠γ干 擾素(IFN-γ),再與 HRP 標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠γ干擾素(IFN-γ)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠γ干擾素(IFN-γ)含量。
二、注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
三、操作程序
四、小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒產(chǎn)品說明
規(guī)格:96T、48T
小鼠γ干擾素試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值為 0.95 以上。 2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于 10%和 10% 。
檢測范圍: 25 pg/mL - 800 pg/mL
靈敏度:小低檢測濃度小于 1.0 pg/mL
保存條件及有效期: 1.試劑盒保存: 2-8℃。 2.有效期: 6 個(gè)月
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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