技術(shù)文獻(xiàn)
常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液甲基綠
考馬斯亮藍(lán)染色脫色液是用于蛋白凝膠考甲基綠 馬斯亮藍(lán)染色后脫色的溶液。采用常規(guī)脫色方法至少脫色可以觀察到蛋白條帶,采用快速脫色方法不足30min內(nèi)即可觀察到蛋白條帶。觀察到清晰的蛋白條帶則需脫色更長(zhǎng)時(shí)間。REGAL常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色脫色液經(jīng)過(guò)改良,不含甲醇,含有刺激性氣味的乙酸,減少了對(duì)人體的傷害。
組成:
產(chǎn)品名稱 規(guī)格
常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液 100ml
說(shuō)明書 一份
存儲(chǔ):室溫,12個(gè)月有效。
自備材料:
1、水平搖床或側(cè)擺搖床
2、蒸餾水
3、20%甘油水溶液
操作步驟(僅供參考):
(一)常規(guī)染色脫色方法
1、凝膠染色后倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用。
2、加入適量脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
3、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫脫色。期間更換脫色液2~4次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1~2h后即可出現(xiàn)。
4、完成脫色后把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,保存可以制備干膠。
(二)快速染色脫色方法
1、凝膠染色后倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用。
2、加入適量脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
3、微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。
4、隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動(dòng)。此時(shí)通常可以觀察到比較清楚的蛋白
5、更換新鮮的脫色液,重復(fù)步驟3和步驟4,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。
6、完成脫色后把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含甘油水溶液中,保存可以制備干膠。
注意事項(xiàng):
1、染色時(shí),如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,可以大大加快染色速度。但加熱時(shí)宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。
2、脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
3、如果希望染色的背景更低,希望獲得更加清晰的蛋白條帶,可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過(guò)蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡過(guò)夜可以獲得背景更低,條帶更清晰的條帶。在次日對(duì)4℃蒸餾水浸泡過(guò)夜的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果,獲得更好的考染蛋白條帶。
4、微波爐加熱導(dǎo)致的高溫會(huì)引起染色液和脫色液中的乙酸的揮發(fā),能在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。
5、本染色液呈酸性,有輕微腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)作必要防護(hù)。
6、為了您的安全和健康,甲基綠請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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