技術(shù)文獻(xiàn)
BUNSEN本生:胎牛血清的技術(shù)指標(biāo)
一、內(nèi)毒素
內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時,才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細(xì)胞提老化。上規(guī)定,胎牛血清的別,應(yīng)以內(nèi)毒素水平的高低來確定,其中,特胎牛血清的內(nèi)毒素應(yīng)<10EU/ml
二、血紅蛋白含量
胎牛血清的顏色會根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
三、總蛋白含量
胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。
四、pH值
根據(jù)藥典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間,并沒有什么具體依據(jù)把進(jìn)口血清和國產(chǎn)血清用7.5這個分界線界定。
五、滲透壓
胎牛血清滲透壓的檢測一般采用冰點法,滲透壓摩爾濃度(mOsmol/kg):280-360之間
六、微生物
包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體等。隨著各個品牌血清生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。支原體通過0.1um3次無菌過濾去除。如CellMax胎牛血清,3次0.1um無菌過濾以后,又通過培養(yǎng)法和DNA染色法進(jìn)行支原體檢測,結(jié)果均呈現(xiàn)陰性才會放行銷售。關(guān)于噬菌體主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難清除,但對血清質(zhì)量影響不大,不過對于工業(yè)生產(chǎn)的客戶來說,往往會采用γ照射的胎牛血清來避免噬菌體。
七、免疫球蛋白
免疫球蛋白的數(shù)值能體現(xiàn)出采血時的牛齡情況,新生牛血清容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高;胎牛血清不含IgM,IgG的含量也較低。可以通過血清蛋白電泳SDS檢測。
低IgG的胎牛血清推薦適用于抗體生產(chǎn)及相關(guān)域。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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