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　　超濾離心管使用需掌握哪些知識(shí)點(diǎn)
 

　　離心管是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會(huì)有一個(gè)類(lèi)似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。

　　選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)，注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買(mǎi)來(lái)的超濾是干燥的，使用加入超純水，水量過(guò)膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過(guò)管頂?shù)陌拙�為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液，超濾管需要插在冰上預(yù)冷。

　　超濾離心管是否要預(yù)處理：

　　超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過(guò)對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來(lái)說(shuō)(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附小化，但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問(wèn)題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對(duì)超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失，大多數(shù)情況下，在濃縮稀蛋白溶液之預(yù)處理柱子可以提高回收率，因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用*高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時(shí)以上，蒸餾水沖洗柱子，再用蒸餾水離心一次以除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用，需要加無(wú)菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn)。

　　如何使用超濾心離心管：

　　1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上，樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。

　　2. 將帶蓋過(guò)濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個(gè)類(lèi)似的裝置來(lái)平衡。

　　3. 使用定角轉(zhuǎn)子時(shí)，將薄膜面板朝上定位，旋轉(zhuǎn) 5000 xg，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。

　　4. 為了回收濃縮的溶質(zhì)，在過(guò)濾裝置的底部插入一個(gè)移液管，通過(guò)左右掃動(dòng)的方式將樣品抽離，以總回收率。超濾液可貯存在離心管中。

　　超濾離心管 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司