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本生闡述:關(guān)于胎牛血清的知識(shí)問(wèn)題 2023已更新(每日/實(shí)時(shí))
閱讀次數(shù):15288 發(fā)布時(shí)間:2023/9/22 10:32:36
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  標(biāo)簽:血清 胎牛血清 本生 冰箱 濾膜 培養(yǎng)基 生長(zhǎng)因子


         關(guān)于胎牛血清的知識(shí)問(wèn)題
 

  Q:血清應(yīng)如何保存?

  未拆封的血清應(yīng)存放于 -15 ℃至 -20 ℃,避免反復(fù)凍融。拆封后的血清應(yīng)無(wú)菌分裝成一次的用量并存放于 -15 ℃至 -20 ℃,2~8 ℃ 溶解后建議盡快使用。

  Q:血清的有效期是多久?

  大部分血清效期是 5 年,針對(duì)每個(gè)批次,請(qǐng)通過(guò)質(zhì)檢文件確定具體效期日期。

  Q:血清應(yīng)如何融解?

  取出的血清置于 2~8 ℃ 融化,不時(shí)旋轉(zhuǎn)混勻,充分融解后分裝或使用。

  Q:血清中出現(xiàn)絮狀沉淀是何原因?如何處理?

  多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成,常見(jiàn)的原因是融化過(guò)程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量?梢 400 g 離心 5 分鐘,取上清,然后過(guò)濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是 0.22 um PES 材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾而不是直接過(guò)濾血清

 

胎牛血清 本生 血清
 

  Q:為什么存放于冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?如何避免?

  在 2~8°C 條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時(shí)處于溶解狀態(tài),在凍融過(guò)程中會(huì)發(fā)生聚集,形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會(huì)影響血清的性能?梢 400 g 離心 5 分鐘,取上清,然后過(guò)濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是 0.22 um PES 材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾而不是直接過(guò)濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于 -15° 至 -20 ℃ 冰箱,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在 2~8 °C 條件下長(zhǎng)時(shí)間放置。

  Q:血清是否需要做滅活處理?

  滅活過(guò)程中,會(huì)導(dǎo)致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長(zhǎng)因子等。所以只有在您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清有特殊要求時(shí),才會(huì)考慮對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。如您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。常見(jiàn)的情況是需要去除血清中的補(bǔ)體蛋白,因?yàn)檠a(bǔ)體在機(jī)體中參與細(xì)胞殺傷,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化,肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過(guò)程,所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。

  Q:如何進(jìn)行血清滅活處理?

  先將血清融化和混勻,熱滅活時(shí)請(qǐng)將其置于 56 ℃ 水浴 30 分鐘。為盡量減少熱滅活對(duì)血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過(guò)大。準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時(shí)將裝有血清和水的容器同時(shí)放入 56 ℃ 水浴, 在裝水的容器中放置溫度計(jì),加熱過(guò)程中不時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當(dāng)溫度計(jì)顯示達(dá)到 56 ℃ 左右,開(kāi)始計(jì)時(shí)。56 ℃ 水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。

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