技術(shù)文獻(xiàn)
elisa實(shí)驗(yàn):引起酶免反應(yīng)顯色淡,靈敏度偏低的原因
引起酶免反應(yīng)顯色淡、靈敏度偏低有很多種因素,下面BUNSEN本生小編給大家介紹幾種可能的較常見的原因:
1. 試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高;要求運(yùn)輸時(shí)置于保溫箱內(nèi)運(yùn)輸,并放足夠數(shù)量的冰塊,盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間。
2. 試劑盒超過(guò)有效期;建議不要使用超過(guò)效期的試劑盒。
3. 試劑、樣品使用未能平衡;建議使用于室溫平衡30分鐘左右。
4. 試劑開啟時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)菌;建議試劑開啟后應(yīng)該于半個(gè)月內(nèi)用完。
5. 移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔。建議使用一次性的吸頭。
6. 恒溫箱溫度不足37℃ (或水浴鍋溫度不足37℃);建議孵育反應(yīng)期間應(yīng)該控制好溫度。
7. 孵育反應(yīng)時(shí)間不足;建議應(yīng)準(zhǔn)確記時(shí)。
8. 洗滌時(shí)沖擊力太大,洗滌液浸泡時(shí)間太長(zhǎng),洗滌次數(shù)增加。建議減少洗滌沖擊力,按說(shuō)明書要求的時(shí)間,準(zhǔn)確記錄洗滌時(shí)間。
9. 顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入;建議應(yīng)該先加顯色劑A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入。
10. 顯色劑反應(yīng)時(shí)間不足;建議準(zhǔn)確記時(shí)。
11. 蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題;建議檢查蒸餾水。
12. 樣品用疊氮鈉防腐,抑制了酶的反應(yīng);建議不能加疊氮鈉防腐。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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