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　　天津本生揭秘：胎牛血清售后常見(jiàn)問(wèn)題
 

　　一：血清中常見(jiàn)的沉淀物問(wèn)題

　　科研人員在使用血清時(shí)常常會(huì)遇到各種沉淀問(wèn)題，血清中可能會(huì)存在以下種類(lèi)的沉淀物：

　　1、纖維蛋白：

　　實(shí)驗(yàn)室人員血清化凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀，它是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響。纖維蛋白是常見(jiàn)的沉淀物，肉眼可觀察的到，直徑達(dá)到1-2mm。纖維蛋白的析出與血清存時(shí)間、化凍次數(shù)、化凍方式等有關(guān)，屬正�，F(xiàn)象，不影響細(xì)胞培養(yǎng)。

　　2、鹽析出(如磷酸鈣)，也是常見(jiàn)沉淀物，鏡下觀察可見(jiàn)晶體或者小黑點(diǎn)，并且在37℃培的時(shí)候會(huì)增加，這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去像是在活動(dòng)，因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。

　　3、膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)。

　　4、其他可能會(huì)增加沉淀的情況：

　　熱滅活

　　在不適宜的溫度環(huán)境中存放

　　Y射線照射

　　配制試劑時(shí)pH的變化

　　二：熱滅活問(wèn)題

　　1、 如何正確熱滅活?

　　將正�；瘍龊蟮难�清56℃30分鐘進(jìn)行滅活，期間應(yīng)進(jìn)行多次搖晃使其受熱均勻。

　　2、為什么血清滅活后產(chǎn)生大量沉淀，有時(shí)在底部還會(huì)出現(xiàn)膠狀物質(zhì)?

　　血清滅活后出現(xiàn)的沉淀大多數(shù)是纖維蛋白析出，屬正�，F(xiàn)象，滅活過(guò)程多次搖晃使血清受熱均勻可以降低蛋白的析出;

　　當(dāng)血清在未化凍狀態(tài)時(shí)直接置56℃水浴或者滅活過(guò)程中局部受熱過(guò)高時(shí)會(huì)產(chǎn)生膠狀沉淀，導(dǎo)致血清無(wú)法繼續(xù)正常使用。

　　3、血清滅活的目的

　　血清熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì)，但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒(méi)有必要。即使是在未稀釋的血清中，也未發(fā)現(xiàn)有明顯的溶血現(xiàn)象。多數(shù)實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過(guò)程，也對(duì)熱敏的補(bǔ)體有滅活的作用。熱滅活另一個(gè)目的是為了使支原體失活。

　　4、什么是滅能?

　　滅活和滅能是同一個(gè)意思，叫法不同。

　　5、是否所有血清使用必須滅活?

　　多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下，熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng)，卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下，其促進(jìn)的比率也是微不足道。另外，血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物污染，從而給用戶和供應(yīng)商都帶來(lái)不必要的麻煩。因此建議，對(duì)血清進(jìn)行滅活的用戶，需要通過(guò)試驗(yàn)來(lái)證實(shí)其必要性。

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