技術文獻
elisa中,包被后需將酶標板進行洗滌和封閉步驟
在ELISA實驗中,包被后需要將酶標板進行洗滌和封閉步驟。
洗滌步驟
洗滌的目的是去除未結(jié)合的包被液,以減少非特異性結(jié)合,提高實驗的特異性。洗滌通常使用洗滌液(如PBST或PBS)進行,每次洗滌后應甩干或拍干,以確保酶標板上的液體去除。洗滌的次數(shù)和洗滌液的用量根據(jù)具體的實驗要求和酶標板的類型而定,但通常需要進行3-5次洗滌。
封閉步驟
封閉是為了封閉酶標板上未被包被液占據(jù)的空隙,防止非特異性結(jié)合。封閉液通常為含有蛋白質(zhì)(如BSA或脫脂奶粉)的溶液,這些蛋白質(zhì)會填充酶標板上的空隙,從而減少后續(xù)實驗中非特異性結(jié)合的發(fā)生。封閉液加入后,通常在37℃下孵育一定時間(如1-2小時),然后進行洗滌,以去除未結(jié)合的封閉液。
注意事項
在進行洗滌和封閉時,應確保酶標板的每個孔都得到充分處理,避免液體殘留或不均勻處理。
洗滌和封閉的條件(如溫度、時間)應根據(jù)具體的實驗要求和酶標板的類型進行調(diào)整。
在進行下一步實驗操作,應確保酶標板干燥,以避免影響后續(xù)的實驗結(jié)果。
通過正確的洗滌和封閉步驟,可以顯著提高ELISA實驗的特異性和準確性。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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