技術(shù)文獻(xiàn)
透析袋/透析膜原理是什么?使用方法介紹
透析袋(別稱:透析膜)通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過程中,除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時(shí)都要用到透析的技術(shù)。
一、透析的原理
透析只需要使用用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。
透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
二、透析的過程
1、把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的 100 倍。(例如,在 1L 透析液中透析 10 ml 的樣品)
2、裁剪適當(dāng)長(zhǎng)度的透析管。預(yù)留一段額外長(zhǎng)度(約占總樣品體積量的 20%)作為頭部空間。
3、把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾 3-5 mm 的位置再夾住。不要折疊透析袋。
4、由透析管開口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長(zhǎng)度,夾緊透析夾。
5、把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。
6、透析要根據(jù)具體的應(yīng)用需求。通常情況下,允許過夜透析。在持續(xù)透析的過程中,至少要進(jìn)行 3 次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4 小時(shí),6-8 小時(shí)和 10-14 小時(shí)(第二天早晨)更換透析液。在一次透析液的更換后,要至少繼續(xù)進(jìn)行 2 小時(shí)的透析。
7、透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá) 37℃。再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá) 60℃。
注意:對(duì)于高濃度污染物,樣品可能需要較長(zhǎng)的時(shí)間透析,透析液需要更頻繁的更換。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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