技術(shù)文獻(xiàn)
白介素Elisa試劑盒檢測原理及操作步驟
一、檢測原理
白介素 Elisa 試劑盒是一種基于酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)原理的試劑盒,用于定量檢測生物樣本中的白介素(Interleukin,IL)含量。該試劑盒利用特異性抗體與白介素結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物,再通過酶標(biāo)記的二抗與復(fù)合物結(jié)合,終通過酶促反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化,實現(xiàn)對白介素的定量分析。
二、操作步驟
1. 準(zhǔn)備工作:仔細(xì)閱讀說明書,準(zhǔn)備好所有需要的試劑和器材,包括白介素 Elisa 試劑盒、樣本、酶標(biāo)儀、微量加樣器、離心管、離心機(jī)等。
2. 樣本處理:根據(jù)說明書要求,對生物樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚,如稀釋、離心等,以便進(jìn)行后續(xù)的測定。
3. 加樣:將處理后的樣本加入試劑盒提供的反應(yīng)孔中,每個孔中加入的樣本量需按照說明書規(guī)定。
4. 加酶標(biāo)抗體:向每個反應(yīng)孔中加入適量的酶標(biāo)二抗,與樣本中的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。
5. 溫育:將反應(yīng)板放入恒溫箱中,按照說明書規(guī)定的溫度和時間進(jìn)行溫育,使酶標(biāo)二抗與抗原-抗體復(fù)合物充分結(jié)合。
6. 洗滌:溫育結(jié)束后,用洗滌液洗滌反應(yīng)孔,去除未結(jié)合的酶標(biāo)二抗和其他雜質(zhì)。
7. 顯色:向每個反應(yīng)孔中加入適量的顯色液,與酶標(biāo)二抗發(fā)生酶促反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化。
8. 終止反應(yīng):在規(guī)定的反應(yīng)時間后,向每個反應(yīng)孔中加入終止液,終止酶促反應(yīng)。
9. 測定:用酶標(biāo)儀測定每個反應(yīng)孔的光密度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本中白介素的含量。
10. 結(jié)果分析:根據(jù)測定結(jié)果,分析樣本中白介素的含量,評估其在生物學(xué)研究或臨床診斷中的意義。
以上即為白介素 Elisa 試劑盒的檢測原理及操作步驟。在使用試劑盒時,需嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行操作,以結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。同時,也需注意實驗過程中的安全和衛(wèi)生,避免交叉污染和誤操作。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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