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本生帶你了解:染色液問題
1、問:一盒染色液能做多少張片子?或者客戶有50個樣本,需要多少染色液?
答:這是沒有辦法統(tǒng)計的,染色過程中一般是將染色液滴加到載玻片上,將樣品覆蓋住,但是由于樣品大小不一致,沒辦法進(jìn)行統(tǒng)計。如果是浸染,每次用量會比較多,有一些染料是先用現(xiàn)配的,這種染料是不能回收的。
2、問:染色試劑盒能不能做植物樣本或者細(xì)菌,真菌?
答:除去門用來染植物的GUS染色,和染細(xì)菌的試劑盒,大部分試劑盒我們是沒有染過這幾種樣本的。因為這幾種樣本都有細(xì)胞壁,染料很難通過細(xì)胞壁,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行染色,所以還是以染哺乳動物組織或者細(xì)胞為主。
3、問:染色試劑盒可不可以染細(xì)胞
答:先建議先看一下說明書,一般說明書上有的,一般是可以染的,但是還是建議根據(jù)實驗結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。部分試劑盒我們標(biāo)注出細(xì)胞用的,是可以做細(xì)胞的,建議先做一下預(yù)實驗。
4、問:彈力纖維染色試劑盒都有哪些?
答: G1589 彈力纖維染色液(地衣紅法):彈力纖維著棕紅色到深棕色,背景著不同程度的灰棕色到淡紅色。
weigert堿性品紅染色液:彈力纖維著深藍(lán)色到藍(lán)黑色,其他組織根據(jù)復(fù)染液的不同而不同著色。
彈力纖維染色液(改良Gomori醛品紅法):彈力纖維紫色到深紫色,肥大細(xì)胞顆粒和黏液質(zhì)呈現(xiàn)紫紅色到深紫色,背景為不同程度程度的黃色
醛品紅染色液
維多利亞藍(lán)彈力纖維染色液:細(xì)胞核呈灰藍(lán)色,膠原纖維、黏液質(zhì)和軟骨呈藍(lán)色,胞漿、肌纖維、纖維素和紅細(xì)胞呈紅色
Verhöeff彈力纖維染色液:彈力纖維著黑色,其他組織根據(jù)復(fù)染液的不同而不同著色。
5、問:纖維染色相關(guān)試劑盒(結(jié)締組織染色相關(guān)試劑盒)有哪些?
答: Masson三色染色試劑盒 :細(xì)胞核呈灰藍(lán)色,膠原纖維、黏液質(zhì)和軟骨呈藍(lán)色,胞漿、肌纖維、纖維素和紅細(xì)胞呈紅色。
Masson三色染色液(固綠法):細(xì)胞核呈藍(lán)紫色,膠原纖維、蛋白呈綠色,胞漿、肌纖維、纖維素和紅細(xì)胞呈紅色。
改良Masson三色染色液:細(xì)胞核呈灰藍(lán)色,膠原纖維、黏液質(zhì)和軟骨呈藍(lán)色,胞漿、肌纖維、纖維素和紅細(xì)胞呈紅色。
Mallory三色染色試劑盒:膠原纖維染成藍(lán)色,細(xì)胞核和肌纖維染成紅色,紅細(xì)胞則被染成橘黃色。
Pollak三色染色液:膠原纖維、粘液、軟骨、神經(jīng)纖維呈現(xiàn)藍(lán)色,肌肉、彈力纖維著為紅色,纖維素為紫紅色,紅細(xì)胞呈橘紅色,細(xì)胞核著灰藍(lán)色。
Russell改良Movat五色套染染色液:細(xì)胞核和彈力纖維呈現(xiàn)黑色,膠原蛋白和網(wǎng)狀纖維被著為黃色,蛋白聚糖著藍(lán)綠色,類纖維素、纖維素為深紅色,心肌平滑肌紅色。
6、問:網(wǎng)狀纖維染色相關(guān)試劑盒有哪些?
答:20 Gordon-Sweets氨銀溶液 :細(xì)胞核呈褐色或黑褐色,膠原纖維著黃色或黃棕色,網(wǎng)狀纖維染成紅褐色到黑色。
網(wǎng)狀纖維染色液(改良Gordon-Sweets法):網(wǎng)狀纖維呈現(xiàn)紅褐色到黑色,膠原纖維著黃色至黃棕色,細(xì)胞核著紅色,細(xì)胞質(zhì)為淡黃色。
Gomori氨銀溶液:網(wǎng)狀纖維是黑色,膠原纖維是黃色或黃棕色,細(xì)胞核呈褐色或黑褐色。
網(wǎng)狀纖維染色試劑盒(改良Gomori氨銀法):網(wǎng)狀纖維呈黑色,膠原纖維呈黃或黃棕色, 細(xì)胞核呈褐或黑褐色。
7、問:肌纖維染色相關(guān)試劑盒有哪些?
答: Mallory磷鎢酸蘇木素染色液(PTAH自然氧化法):橫紋肌的橫紋、纖維素、細(xì)胞核、紅細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)纖維著深藍(lán)色,膠原纖維、軟骨基質(zhì)呈現(xiàn)棕紅色,粗的彈性纖維著為紫色。
Mallory磷鎢酸蘇木素(PTAH自然氧化法):橫紋肌的橫紋、纖維素、細(xì)胞核、紅細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)纖維著深藍(lán)色,膠原纖維、軟骨基質(zhì)呈現(xiàn)棕紅色,粗的彈性纖維著為紫色。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色液(PTAH化學(xué)氧化法):橫紋肌的橫紋、纖維素、細(xì)胞核、紅細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)纖維著深藍(lán)色,膠原纖維、軟骨基質(zhì)呈現(xiàn)棕紅色,粗的彈性纖維著為紫色。
Mallory磷鎢酸蘇木素(PTAH化學(xué)氧化法):橫紋肌的橫紋、纖維素、細(xì)胞核、紅細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)纖維著深藍(lán)色,膠原纖維、軟骨基質(zhì)呈現(xiàn)棕紅色,粗的彈性纖維著為紫色。
肌纖維染色液(Puchtler鞣酸偶氮熒光桃紅法):肌纖維、肌上皮細(xì)胞著紅色,結(jié)締組織著不同程度的黃色,細(xì)胞核著藍(lán)色。
磷鉬酸水溶液(1%):膠原纖維染色,或其他染色液的輔助染料
偶氮熒光桃紅染色液:肌纖維染色。
8、問:尼氏染色相關(guān)試劑盒有哪些?
答:尼氏染色液(焦油紫法):尼氏體著紫色,背景無色或者淺藍(lán)色。
尼氏染色試劑盒(甲基紫法):尼氏體著紫黑藍(lán)色,神經(jīng)元著淺紫藍(lán)色,細(xì)胞核著紫藍(lán)色。
尼氏染色液(亞甲藍(lán)法):尼氏體著藍(lán)色。
尼氏染色液(甲苯胺藍(lán)法):尼氏體著紫藍(lán)色,細(xì)胞核著淺藍(lán)色,背景呈無色或淺藍(lán)色。
尼氏染色液(硫堇法):尼氏體呈深藍(lán)色,細(xì)胞核呈淡藍(lán)色。
9、問:怎么選擇染色液試劑盒的規(guī)格?
答:一般染色液使用量是覆蓋住樣本即可,這樣的染色液客戶可以根據(jù)自己樣本的大小,預(yù)估一下,一張片子的大概用量,來計算大概一共需要多大規(guī)格的染色液。但是一些染色時間比久,染色液容易揮發(fā)的試劑,需要用到浸染,浸染的染色液除了現(xiàn)配現(xiàn)用的試劑外,一般可以重復(fù)用多5次,但是重復(fù)用的次數(shù),需要根據(jù)實際染色效果來確定,多次重復(fù)使用的染色液,后續(xù)的染色效果都不如面的染色效果好。滴染的染色液,一般都不建議回收。
10、問:有的染色試劑盒的說明書上的操作步驟,寫的是用石蠟切片,冰凍切片或者組織樣本可以用嗎?
答:我們這邊之檢測染色試劑盒的主要樣本用的是石蠟切片,說明書上沒有寫冰凍切片和細(xì)胞不代表不能做,先您可以先參考一下相關(guān)文獻(xiàn),采用這種染色方法的是否有報道用于冰凍切片上,或者細(xì)胞上,然后,您可以參考文獻(xiàn)上的操作方法,做一下預(yù)實驗,根據(jù)預(yù)實驗的結(jié)果調(diào)整相應(yīng)的染色步驟。
11、問:我完全按照染色液說明書的操作方法進(jìn)行的染色,為什么沒出結(jié)果?
答:先,建議您參考一下相關(guān)文獻(xiàn),并根據(jù)您的染色結(jié)果調(diào)整一下您的染色步驟,因為我們檢測的樣本數(shù)有限,所以我們說明書中提供的染色步驟僅供您參考。不同的樣本中相關(guān)物質(zhì)的含量是不一樣的,對染色液的敏感性也不一樣,所以,染出來的效果會有差異,所以建議您根據(jù)您的實驗結(jié)果以及參考相關(guān)文獻(xiàn),對相關(guān)的染色步驟和時間進(jìn)行調(diào)整。
其次,您可以把您的具體操作步驟,以及您染色的結(jié)果發(fā)到我們的技術(shù)郵箱中,我們幫您分析一下。
12、問:masson 三色苯胺藍(lán)著色比較淺怎么辦?
答:masson 三色的染色原理主要是根據(jù)染料分子量大小不同對纖維進(jìn)行著色,苯胺藍(lán)分子量比較大,不容易滲透進(jìn)纖維中,所以如果苯胺藍(lán)著色比較淺可以延長苯胺藍(lán)染色時間,并且磷鉬酸是苯胺藍(lán)著色的媒介物質(zhì),也可以延長磷鉬酸的處理時間,但是需要注意的是,苯胺藍(lán)著色過深的話,會影響對其他顏色的觀察,課根據(jù)實際結(jié)果調(diào)整染色時間。
13、問:臺盼藍(lán)染色液有沉淀,怎么辦?還能用嗎?
答:這個染色液有沉淀是正常的,如果有沉淀先在37度水浴中孵育一下,然后用濾紙過濾,這樣就可以正常使用啦。
14、問:細(xì)胞涂片怎么制備?
答:先收集好細(xì)胞,然后洗滌細(xì)胞,將細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液,取一些單細(xì)胞懸液滴加到載玻片上,將蓋玻片與載玻片呈 30-45度角,輕壓推片邊緣將單細(xì)胞懸液推制成厚薄適宜的單細(xì)胞涂片。然后做好標(biāo)記,晾干,固定后,進(jìn)行后續(xù)具體染色實驗。細(xì)胞密度還需要進(jìn)行幾次嘗試,以達(dá)到好的結(jié)果。
染色液 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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