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ELISA試驗(yàn)吸光值均偏高的原因以及解決辦法
ELISA 即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,是一類常用的免疫酶技術(shù)。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,然后利用酶標(biāo)記(偶聯(lián))的抗體或抗原與之孵育,加入顯色劑顯色,通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定待測(cè)物顏色與標(biāo)準(zhǔn)物顏色的差異,繪制出酶活曲線得出待測(cè)物濃度。ELISA試劑盒吸光值均偏高的原因以及解決辦法:
1.原因:室溫太高。
解決辦法: 若無(wú)法降低室內(nèi)溫度,請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間。
2.原因:底物溶液受到污染。
解決辦法: 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請(qǐng)不要再使用。
3.原因:反應(yīng)時(shí)間超過(guò)太久。
解決辦法:請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。
4.原因:ELISA試劑盒酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
解決辦法:使用過(guò)的吸頭應(yīng)立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過(guò)的容器應(yīng)立即清洗干凈。
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